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城大創新方法活檢RNA結合蛋白 助研新型冠狀病毒藥物

黃穎嘉

 

(Front row from left) Dr Zhang Liang, Dr Yan Jian and Dr Chan Kui-ming, and their team have developed CAPRID that can rapidly detect binding proteins of any target RNA in living cells.
(前排左起)張亮博士、嚴健博士和陳居明博士及其研究團隊。

 


香港城市大學(城大)的研究團隊開發嶄新檢測方法,能夠檢測活細胞內與非編碼RNA(核糖核酸)結合的蛋白質。這項新技術有望應用於癌癥診斷與幹細胞研究,甚至有助找出治療新型冠狀病毒的潛在藥物靶點。

非編碼RNA被普遍認為是表觀遺傳調控的重要因子,並與許多疾病的形成有關。然而,要明確了解它們與活細胞中蛋白質之相互作用,有很大技術局限,因此其生物功能仍是未解之謎。

為進一步揭示其作用以作出診斷或治療,研究團隊開發了名為「以CRISPR輔助檢測RNA與蛋白質相互作用」(CARPID)的新技術,可以靈敏地在活細胞中檢測與目標RNA結合的蛋白質。
 
這項研究由城大生物醫學系副教授嚴健博士、張亮博士陳居明博士共同領導。研究結果早前在科學期刊《自然方法》上發表,題為「以CRISPR輔助檢測活細胞內RNA與蛋白質相互作用」。該刊的影響因子(Impact Factor)在生物醫學領域位列第一。

Mass spectrometry used to identify binding proteins of specific non-coding RNAs.
用於識別特定非編碼RNA結合蛋白的質譜儀。

 

研究團隊借助現時最先進的基因編輯技術CRISPR/dCasRx系統導航,找出目標RNA,再運用鄰近生物素標記技術,找出活細胞中RNA與蛋白質的相互作用。

研究團隊認為CARPID的應用範圍廣泛,包括檢測病毒RNA的結合蛋白。嚴博士說:「舉個例子,SARS-CoV-2就是一種引起新型冠狀病毒的RNA病毒。一旦細胞受病毒感染,我們可以用CARPID來檢測該RNA病毒在病毒生命周期中與哪些細胞蛋白結合。如果能夠減少這些結合蛋白的數量,或許可以抑制病毒的複製。這些資訊可能有助找出潛在的抗病毒藥物靶點。」

張博士指出,由於非編碼RNA在癌細胞的數量比在正常細胞內高出很多,因此被視為診斷癌癥的生物標誌物。如果可檢測癌細胞中這些非編碼RNA的結合蛋白,或有助找出致癌機制及用於癌癥診斷或治療的潛在藥物靶點。研究團隊亦會嘗試將新方法應用於幹細胞研究。

此外,該檢測可在活細胞中進行,並在生理狀態下完全恢復RNA與蛋白質之間的相互作用;同時能夠靈敏地檢測出任何長度或濃度的RNA結合蛋白,而大部分現有方法只能應用於較長的非編碼RNA。

陳博士、嚴博士、張博士是論文的共同通訊作者。論文的共同第一作者是生物醫學系博士生李靖宇朱孝軒,以及來自西安西北大學的易文凱王曦博士。

 

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