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城大科學(xué)家破解令線蟲(chóng)免于便秘的生物時(shí)鐘之謎

 

一支由香港城市大學(xué)(城大)神經(jīng)科學(xué)家共同領(lǐng)導(dǎo)的科研團(tuán)隊(duì)最近解開(kāi)了一個(gè)30年的謎團(tuán)。團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)令線蟲(chóng)定時(shí)排便的關(guān)鍵神經(jīng)機(jī)制︰透過(guò)線蟲(chóng)頭部產(chǎn)生的神經(jīng)脈沖,在線蟲(chóng)體內(nèi)形成一個(gè)準(zhǔn)確及穩(wěn)定的“生物時(shí)鐘”,確保線蟲(chóng)每隔大約45秒便定時(shí)排便一次,令排便的節(jié)奏不會(huì)出錯(cuò),也絕不會(huì)便秘。科學(xué)家相信上述的研究成果,有助日后研究更高等動(dòng)物的大腦功能。

秀麗隱桿線蟲(chóng)(Caenorhabditis elegans,簡(jiǎn)稱C. elegans)在神經(jīng)科學(xué)研究中早已獲得近乎徹底的研究分析,其神經(jīng)系統(tǒng)全部302種細(xì)胞都已被識(shí)別及命名,科學(xué)家更已繪制了圖譜,詳列出這種線蟲(chóng)神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞所有的神經(jīng)突觸連接。但這種微小至肉眼幾乎看不到的小線蟲(chóng),體內(nèi)卻存在一個(gè)可媲美電子鐘的奇妙生物時(shí)鐘,其背后的運(yùn)作機(jī)制一直是個(gè)謎。

Caenorhabditis elegans
螢光光學(xué)顯微鏡下的秀麗隱桿線蟲(chóng)。(圖片來(lái)源:香港城市大學(xué)劉強(qiáng))

直至最近,由城市大學(xué)神經(jīng)科學(xué)系助理教授劉強(qiáng)及北京大學(xué)的陶樂(lè)天博士共同指導(dǎo)的一個(gè)科研團(tuán)隊(duì)終解開(kāi)了上述謎團(tuán),研究成果早前并已刊登在著名的學(xué)術(shù)期刊《自然通訊》,標(biāo)題為〈C. elegans enteric motor neurons fire synchronized action potentials underlying the defecation motor program〉。

“僅一毫米長(zhǎng)的秀麗隱桿線蟲(chóng),被世界各地的生命科學(xué)家用作為模式生物。野生型的線蟲(chóng)在食物極度充足的情況下會(huì)不停地吃東西,并每隔45秒就會(huì)排便一次,幾乎像時(shí)鐘一樣精確。它為什么以及如何能做到這一點(diǎn),吸引了不少科學(xué)家去研究背后的機(jī)制。”負(fù)責(zé)共同領(lǐng)導(dǎo)這次研究的劉強(qiáng)續(xù)說(shuō)︰“我們最新的研究發(fā)現(xiàn)終于解開(kāi)了這個(gè)30年的謎團(tuán),這不但加深了我們了解節(jié)律性的行為是如何產(chǎn)生,亦令我們更深入地理解到動(dòng)物的神經(jīng)系統(tǒng)和生理學(xué)之間的聯(lián)系?!?/p>

腸腦回路

秀麗隱桿線蟲(chóng)調(diào)節(jié)腸道運(yùn)動(dòng)所涉及的兩個(gè)重要神經(jīng)細(xì)胞,分別是線蟲(chóng)頭部的AVL和尾部的DVB。劉強(qiáng)說(shuō)︰“科學(xué)界早已知道,秀麗隱桿線蟲(chóng)的腸道會(huì)在上皮細(xì)胞中產(chǎn)生周期性的‘鈣波(鈣的周期性增加)’,鈣波會(huì)引發(fā)腸道神經(jīng)肽的釋放,從而刺激AVL和DVB兩種神經(jīng)細(xì)胞,導(dǎo)致排便。但是,腸道和腦部之間溝通的基本機(jī)制,則一直仍未清楚。因?yàn)閮蓚€(gè)腸道神經(jīng)元,一個(gè)在線蟲(chóng)的頭部,另一個(gè)在尾部,究竟它們?nèi)绾文軌蛟谌绱碎L(zhǎng)的距離上相互通訊、同時(shí)又可以極為可靠及準(zhǔn)確地處理從腸道收到的定時(shí)訊號(hào)?”他認(rèn)為這次研究正好解答了以上難題:“我們首次證明了AVL和DVB神經(jīng)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生‘全或無(wú)(all-or-none)’的尖峰脈沖,又或稱為‘動(dòng)作電位(action potentials)’,這種數(shù)碼訊號(hào)令到線蟲(chóng)頭部的AVL即時(shí)向尾部的DVB進(jìn)行長(zhǎng)距離通訊,以調(diào)節(jié)糞便的排出?!?/p>

C. elegans
圖1:整條“秀麗隱桿線蟲(chóng)(C. elegans)”的鈣螢光圖像,顯示出:

(圖a)在神經(jīng)細(xì)胞被激活前,線蟲(chóng)從頭到尾的三個(gè)研究部分(圖中從左到右的三個(gè)方框);

(圖b)在腸道發(fā)出首輪鈣波之后,線蟲(chóng)頭部的AVL神經(jīng)細(xì)胞(左格、大箭頭)、AVL神經(jīng)纖維(左和中格、小箭頭)、肛門前神經(jīng)與肌肉交界處(右格、小箭頭)和線蟲(chóng)尾部的DVB神經(jīng)細(xì)胞(右格、大箭頭)被激活。右格的紅色星號(hào)*顯示一個(gè)與排便周期無(wú)關(guān)及未受影響的細(xì)胞,以作為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。(圖片來(lái)源: DOI:10.1038/s41467-022-30452-y) 

簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),線蟲(chóng)頭部的AVL神經(jīng)細(xì)胞定時(shí)控制排便。該細(xì)胞每隔45秒左右發(fā)出一次神經(jīng)脈沖(或是放電的爆發(fā))。每個(gè)脈沖都會(huì)立即通過(guò)神經(jīng)纖維沿著線蟲(chóng)身體傳遞,直達(dá)尾部的DVB神經(jīng)細(xì)胞。然后DVB會(huì)被激發(fā)出一個(gè)脈沖,與來(lái)自頭部神經(jīng)細(xì)胞近乎同步的脈沖,一起刺激腸肌肉排出糞便。

由于每次發(fā)出神經(jīng)脈沖的過(guò)程,鈣離子都會(huì)涌入細(xì)胞內(nèi),研究人員遂通過(guò)使用特殊的顯微鏡來(lái)觀察由AVL到DVB的訊號(hào)傳導(dǎo),這些線蟲(chóng)經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)基因編輯,在有鈣的時(shí)候會(huì)在腸道和神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出綠色螢光。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,研究人員首先觀察到有一輪的鈣波沿腸道向下移動(dòng),大約3秒鐘后,他們?cè)贏VL和DVB幾乎同時(shí)檢測(cè)到出現(xiàn)鈣峰值。該峰值持續(xù)半秒,并大約每45秒重復(fù)出現(xiàn)一次(見(jiàn)圖1)。

AVL和DVB的鈣峰值與秀麗隱桿線蟲(chóng)由頭到尾的肌肉運(yùn)動(dòng)相吻合,這些運(yùn)動(dòng)幾乎與糞便的排出同時(shí)發(fā)生。透過(guò)上述的發(fā)現(xiàn),研究人員得出結(jié)論,盡管線蟲(chóng)的腸道負(fù)責(zé)整個(gè)排便過(guò)程的大體節(jié)奏,但同步的AVL和DVB脈沖,正是控制著排便過(guò)程所需的從頭到尾身體活動(dòng)和腸道運(yùn)動(dòng)的精確時(shí)間和協(xié)調(diào)。(觀看視頻)

多重任務(wù)的動(dòng)作電位

C. elegans
圖2:有規(guī)律的排便行為背后的尖峰神經(jīng)元回路模型說(shuō)明。
(圖片來(lái)源:香港城市大學(xué)劉強(qiáng))

研究人員透過(guò)對(duì)單個(gè)的AVL和DVB細(xì)胞的膜電壓直接測(cè)量,亦確認(rèn)了其動(dòng)作電位的尖峰值的分布。他們仔細(xì)地測(cè)量后發(fā)現(xiàn),線蟲(chóng)頭部AVL產(chǎn)生的脈沖是一種不尋常的動(dòng)作電位,由兩個(gè)極接近的尖峰組成。第一個(gè)尖峰是一個(gè)正向和快速的訊號(hào)(信號(hào)在100毫秒內(nèi)上升到峰值,如圖2的紅圈),并快速傳播到DVB(毫秒之內(nèi)),隨即啟動(dòng)了導(dǎo)致排便的一系列肌肉運(yùn)動(dòng)。第二個(gè)尖峰則是一個(gè)負(fù)向和較慢的訊號(hào)(以秒為單位,圖2的黃圈),它會(huì)及時(shí)終止之前的正向尖峰訊號(hào)以抑制進(jìn)一步的腸道運(yùn)動(dòng),從而防止過(guò)量排便。此外,每個(gè)AVL脈沖之后,還會(huì)出現(xiàn)持續(xù)的“超級(jí)化后電位”(after-hyperpolarization)(以數(shù)十秒為單位,圖2的綠圈),以抑制DVB及防止它在不適當(dāng)?shù)臅r(shí)候發(fā)出排便脈沖。

劉強(qiáng)說(shuō):“線蟲(chóng)頭部的AVL神經(jīng)細(xì)胞在不同的時(shí)間尺度上,都對(duì)調(diào)節(jié)排便節(jié)奏方面起著最關(guān)鍵的作用。它不僅可作轉(zhuǎn)發(fā),還可以在每個(gè)排便周期內(nèi)透過(guò)重置系統(tǒng)來(lái)調(diào)節(jié)來(lái)自腸道的排便節(jié)奏訊號(hào),防止在排便周期之間誤發(fā)神經(jīng)脈沖,從而使到線蟲(chóng)的生物時(shí)鐘保持穩(wěn)定及準(zhǔn)確?!?/p>

C. elegans
城市大學(xué)神經(jīng)科學(xué)系助理教授劉強(qiáng)。

這項(xiàng)研究為將來(lái)進(jìn)一步研究腸道與大腦的通訊和其他節(jié)律性動(dòng)物行為背后的生物時(shí)鐘系統(tǒng),開(kāi)辟了新的路徑。劉強(qiáng)補(bǔ)充道:“我深信從這次線蟲(chóng)研究中發(fā)掘到的大腦功能基本原理,將會(huì)成為一塊跳板,有助我們?nèi)蘸笤黾訉?duì)更復(fù)雜的大腦如人腦的理解?!?/p>

這篇科學(xué)論文的共同第一作者是江靜媛蘇逸凡,他們都是北京大學(xué)陶樂(lè)天博士指導(dǎo)的博士生。論文通訊作者是香港城大劉強(qiáng)。這項(xiàng)研究主要得到美國(guó)國(guó)家科學(xué)基金會(huì)、美國(guó)Kavli NSI Pilot Grant和中國(guó)國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)的支持。

DOI: 10.1038/s41467-022-30452-y

本文于 “香港城大研創(chuàng)” 微信公眾號(hào)發(fā)布。
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